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婴幼儿乳品中肌醇的测定

应用简介

婴幼儿乳品中肌醇的测定——应用编号:AF10015

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前言

肌醇,中文别名:肌糖;环己六醇;纤维醇(肌糖)。肌醇广泛分布在动物和植物体内,是动物、微生物的生长因子。最早从心肌和肝脏中分离得到。主要用于治疗肝硬变、肝炎、脂肪肝、血中胆固醇过高等症。肌醇是广泛存在于食物中的一种物质,结构类似于葡萄糖。在动物细胞中,它主要以磷脂的形式出现,有时则称为肌醇磷脂。在谷物中则常与磷酸结合形成六磷酸酯即植酸,而植酸能与钙、铁、锌结合成不溶性化合物,干扰人体对这些化合物的吸收。但大豆中的肌醇则为游离状态。肌醇是一种“生物活素”,参与体内的新陈代谢活动,具有免疫、预防和治疗某些疾病等多种作用,在发酵和食品工业中,可用于多种菌种的培养和促进酵母的增长等、高等动物若缺乏肌醇,将会出现生长停滞和毛发脱落等现象,人体每天对肌醇的需求量是1 - 2g,许多保健饮料和儿童食品都加有微量肌醇。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

气相色谱仪-氢火焰离子化检测器

试剂材料

无水乙醇、正己烷均为色谱纯;

三甲基氯硅烷、六甲基二硅胺烷、N,N-二甲基甲酰胺为分析纯

肌醇标准品(纯度99%);

95%乙醇溶液:量取95 mL无水乙醇,用水定容至100 mL,摇匀;

硅烷化试剂:分别吸取体积比为1︰2的三甲基氯硅烷和六甲基二硅胺烷,超声混匀。现用现配。

注:N,N-二甲基甲酰胺、三甲基氯硅烷和六甲基二硅胺烷必须保证当三者混合后无白色浑浊现象时方可使用。

样品制备

称取已研磨混合均匀的样品1 g于50 mL容量瓶中,加入12 mL 40℃温水溶解试样,超声提取10 min,用95%乙醇溶液定容至刻度,混匀。静置20 min后,取10 mL置于15 mL离心管中,以不低于4000 r/min离心5 min。取上清液5 mL于鸡心瓶中,向鸡心瓶中加入10 mL无水乙醇,在80℃旋转蒸发至近干时再加入5 mL无水乙醇继续浓缩至干,将鸡心瓶转移至烘箱中100℃±5℃烘干1 h。加入10 mL N,N-二甲基甲酰胺,超声溶解5 min并转移至50 mL离心管中,加入硅烷化试剂3 mL并放于80℃±5℃水浴中衍生反应75 min,其间每隔20 min取出振荡一次。然后取出冷却至室温,加入5 mL正己烷,振荡混合后静置分层。取上层液3 mL于预先加少许无水硫酸钠的离心管中,振荡后以不低于4000 r/min离心,此为试样测定液。

实验条件

气相条件

气相色谱柱:DA-50+ 50%苯基-甲基聚硅氧烷色谱柱 60 m × 0.25 mm × 0.25 µm

进样口温度:280℃;检测器温度:300℃

分流比:10︰1;进样量:1.0 µL。

升温程序见表1

表1 升温程序

升温速率(℃/min)

温度(℃)

持续时间(min)

初始温度

120

0

10

190

50

10

220

3

结果与讨论

实验结果

经图1可知,使用DA-50+ 50%苯基-甲基聚硅氧烷色谱柱检测婴幼儿乳品中的肌醇,分离度良好,且峰形良好,能够满足检测要求。

图1 婴幼儿乳品中的肌醇(色谱峰 1)

结论

本实验依据GB 5009.270-2016第二法,用DA-50+ 50%苯基-甲基聚硅氧烷色谱柱检测婴幼儿乳品中的肌醇,并结合气相色谱-氢火焰离子化检测器对样品进行了检测,结果分离度良好,且肌醇峰形良好,说明DA-50+ 50%苯基-甲基聚硅氧烷色谱柱能够用于婴幼儿乳品中肌醇的检测。

注意事项

试液提取过程中,蒸干时要确保没有残留的水分,否则会影响下一步的衍生;衍生过程中要严格控制反应时间及反应温度,其对实验结果影响较大。

附:相关产品

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

DA-50+ 50%苯基-甲基聚硅氧烷色谱柱

60 m × 0.25 mm   × 0.25 µm

1支

5025-6002

1.5 mL样品瓶

短螺纹透明带书写处

32 × 11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5mL样品瓶盖

9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色PTFE隔垫

45°Shore A; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

应用编号:AF10015

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