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可口可乐中八种人工着色剂残留量的分析方法

应用简介

本实验重现了食品中八种人工着色剂检测的实验方案,样品经超声去除二氧化碳,Cleanert® PWAX固相萃取柱净化,Venusil® XBP C18 (L)色谱柱(4.6 × 150 mm,5 μm,150 Å)分离,0.02 mol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,外标法进行定量。结果表明,八种着色剂添加量为0.01 mg/kg、0.05 mg/kg时,回收率在60% ~ 110%之间,能够满足检测要求。

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人工合成着色剂又称人工合成色素,常以苯、甲苯等为原料,先制备色素中间体,再将一种或两种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成。着色剂的添加使用在现代饲料工业和现代畜牧水产养殖业中日益普遍。通过着色剂改变饲料的色泽,特别是在日益增加使用非传统饲料原料的情况下,添加着色剂以便掩盖某些非传统饲料原料(如菜籽饼粕等)的不良颜色,迎合用户心理习惯,增加市场竞争力;同时,也起到刺激食欲和诱食的作用;还可以通过着色剂改善畜、禽、水产品的色泽,提高其商品价值。如添加着色剂使肉鸡皮肤、禽蛋卵黄、牛奶的黄油以及鱼虾等水产品的肉质具有更鲜艳、美观的色泽和更优良的产品质量,迎合消费者的心理。生产企业违禁添加着色剂,长期食用此类产品将严重危害人体健康。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

Agilent 1100高效液相色谱仪;

博纳艾杰尔12位负压SPE装置。

试剂材料

甲醇为色谱纯;实验用水为超纯水;乙酸铵、氨水均为分析纯;

八种着色剂混合标准品(纯度99%);

2%氨化甲醇溶液:量取氨水2 mL,加甲醇溶解并稀释至100 mL,摇匀;

0.02 mol/L乙酸铵溶液:称取乙酸铵1.54 g,用水溶解并稀释至1000 mL。

一次性无菌注射器;PTFE针式过滤器(0.45 μm,直径13 mm);

Cleanert® PWAX固相萃取柱:200 mg/3 mL。

样品制备

样品提取

称取10 g样品放入100 mL烧杯中,超声去除二氧化碳。

样品净化

先将Cleanert® PWAX (200 mg/3 mL)小柱分别用6 mL甲醇,6 mL水溶液活化平衡;然后将待净化液过柱;用6 mL水和6 mL甲醇洗柱,弃去全部流出液,小柱用真空泵抽干;最后用6 mL 2%氨化甲醇洗脱。收集洗脱液于40℃下氮气吹干,用1 mL水溶解残留物,过0.45 μm亲水滤膜后待测。

注:上述操作步骤可在Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪上完成。

色谱条件

色谱柱:Venusil® XBP C18 (L),5 μm,150 Å,4.6 × 150 mm;

流动相:A相-0.02 mol/L乙酸铵溶液,B相-甲醇;

柱 温:30℃;

进样量:20 μL;

流 速:1 mL/min;

梯度洗脱:见表1

表1. 液相色谱梯度洗脱条件

时间/min

A/%

B/%

0

95

5

10

80

20

18

40

60

25

40

60

25.01

95

5

40

95

5

表2.液相色谱检测波长梯度条件

波长梯度1

波长梯度2

时间

波长/nm

时间

波长/nm

0

428

0

521

10

428

10

521

10.01

509

10.01

483

15

509

16

483

15.01

507

16.01

600

17.5

507

21

600

17.51

510

21.01

529

21

510

30

529

21.01

529

30.01

521

30

529

40

521

30.01

428



40

428



波长梯度1适用于柠檬黄、胭脂红、诱惑红、酸性红、赤藓红;波长梯度2适用于苋菜红、日落黄、亮蓝和赤藓红。

结果与讨论

由表3可知,采用固相萃取结合液相色谱法检测八种着色剂加标回收率在60% ~ 110%之间,能够满足标准要求。

表3. 八种着色剂加标回收实验结果(n=3)

物质名称

添加水平/(mg/kg)

平均回收率

/%

RSD

/%

柠檬黄

Lemon Yellow

0.01

92.7

3.2

胭脂红

carminum

92.6

9.2

诱惑红

The temptation of   red

91.1

4.9

酸性红

Carmosine

92.3

2.1

赤藓红

erythrosine

69.6

9.1

苋菜红

amaranth

83.6

7.9

日落黄

sun   set yellow

83.7

3.1

亮蓝

 light blue

102.8

6.7

柠檬黄

Lemon Yellow

0.05

94.8

1.5

胭脂红

carminum

99.3

4.4

诱惑红

The temptation of   red

97.8

9.0

酸性红

Carmosine

91.9

2.8

赤藓红

erythrosine

83.1

1.4

苋菜红

amaranth

99.2

6.8

日落黄

sun   set yellow

90.7

3.5

亮蓝

 light blue

101.5

5.7

结论

本实验重现食品中八种着色剂的残留量检测的实验,并结合高效液相色谱对可口可乐中八种着色剂残留物的含量进行了测定。对于加标量为0.01 mg/kg、0.05 mg/kg的样品进行了检测,回收率在60% ~ 110%之间,符合要求。

附:相关产品

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

Venusil® XBP C18 (L)

5 μm150 Å4.6 ×   150 mm

1

VX951505-L

Cleanert® PWAX

200 mg/3 mL

50/pk

WA2003

1.5 mL样品瓶

短螺纹透明带书写处

32 × 11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5 mL样品瓶盖

9    mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色PTFE隔垫

45°Shore   A; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

氮吹仪

15

1

NV15-M

Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪

24位,四通道

1

SPE-40

固相萃取真空装置

12

1

VM12

针式过滤器(PTFE)

单膜,13    mm0.45 μm

200/

AS081345

微孔滤膜

50    mm0.45μm

200/

AM021345

一次性注射器

2 mL无针头

100/

LZSQ-2ML

甲醇

4 L/瓶,色谱纯

4×4 L/

AH230-4

应用编号:AF10111

  • Venusil XBP C18(L)

    Venusil XBP C18采用特殊的键合工艺,双封尾,键合密度大,碳含量高,疏水性较高(极性低),适用于各类非极性化合物分析,在酸或碱性流动相下都有很好的分离效果。

  • Cleanert PWAX

    Cleanert PWAX 是弱阴离子交换与反相混合机理的萃取小柱。是以水可浸润型聚合物为基质。pH 0~14 范围内都很稳定。用于提取生物基质的酸性化合物及其代谢产物。相当于Waters Oasis WAX。

  • ND9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:Agilent Thermo Scientific Varian Waters etc.

  • Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪

    Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪是针对食品、农产品、医药等行业污染物分析而设计的样品前处理设备,可以实现从活化、上样、淋洗至洗脱整个固相萃取过程的全自动化。4 萃取通道,连续处理24 个样品,通过独特的设计,实现小体积上样的同时,兼顾大体积样品中有机物、重金属、农药残留等痕量污染物的富集。

  • 样品浓缩氮吹仪

    8 孔氮吹

  • NV24A-II 全自动浓缩氮吹仪

    NV24A-II 全自动浓缩氮吹仪具有处理量大、环保、自动化程度高等优点,应用于各种类型的自动化工作站,遍及环保、供水、药检、食品检验、法医鉴定等领域,适用于较高端样品前处理的实验室要求。

  • 15位干式电模块氮吹仪

    ◆ 操作简洁、灵活、控温方便,可以不受约束的随时调节浓缩的过程。 ◆ 采用喷砂镀铝模块,加热模块为15孔,直径19mm×深度75mm的大容量加热快。 ◆ 吹扫针支架可根据需要上下自由调节高度。 ◆ 进口数字温控器,双数字显示触摸功能,可方便调节加热温度。 ◆ 配气系统的吹扫针能单独关断,可意思处理多个样品。 ◆ 加取样品时可90℃偏转吹扫针座,方便加取。 ◆ 可精确调节吹扫气流量。

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