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LC/MS/MS法测定Cleanert PEP提取血浆中吲哚美辛和布洛芬含量

应用简介

非甾体抗炎药:吲哚美辛与布洛芬均为非甾体抗炎药,布洛芬临床广泛用于治疗神经痛、牙痛、痛经、关节痛及感冒综合症等,吲哚美辛用于风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肿瘤止痛及肿瘤血液病退热。

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吲哚美辛与布洛芬均为非甾体抗炎药,布洛芬临床广泛用于治疗神经痛、牙痛、痛经、关节痛及感冒综合症等,吲哚美辛用于风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肿瘤止痛及肿瘤血液病退热。本应用开发血浆中吲哚美辛及布洛芬检测前处理方法,为临床合理用药及药代动力学研究提供依据。

目标物信息

材料及仪器

Cleanert PEP 96微孔板(5 mg/mL),96孔正压装置;96孔收集板;Venusil XBP C18(A)(2.1*150 mm,5 μm,120 Å);API 4000+。

样品处理方法

样品预处理

取50 μL血浆与50 μL 2%甲酸水溶液混合,涡旋震荡1 min,混合均匀,待净化。

净化过程

活化:200 μL 甲醇,200 μL水;

上样:将待净化液全部上样;

淋洗:加入200 μL 甲醇/水溶液(5/95, v/v);

洗脱:100 μL 乙腈,收集洗脱液并进样检测。

仪器检测条件

HPLC条件

色谱柱:Venusil XBP C18(A)(2.1*150 mm,5 μm,120 Å)

流速:200 μL/min

柱温:30 ℃

进样量:3 μL

流动相:乙腈/水(75/25,v/v)

质谱条件

扫描模式:电喷雾电离负模式

采集模式:多反应监测(MRM)

表1 参数信息

化合物

保留时间/min

Q1

Q3

DP

CE

吲哚美辛

3.11

356.0

312*

-65

-14

296.7

-65

-25

270.1

-65

-23

布洛芬

3.40

205.2

160.6*

-60

-10

159.1

-65

-9.6

注:加*为定量离子

结果

图3 吲哚美辛与布洛芬标准溶液色谱图(浓度为10 ng/mL)

图4 血浆加标样色谱图(加标浓度为10 ng/mL)

图5 血浆样品色谱图

表2 回收率数据及LOD

化合物

加标浓度

平均回收率 (%)

RSD (n=5, %)

LOD (ng/mL)

吲哚美辛

5 ng/ml

87.80%

2.60%

0.5

20 ng/ml

97.70%

3.90%

50 ng/ml

95.20%

4.70%

布洛芬

5 ng/ml

100.80%

2.90%

1.0

2 0ng/ml

98.20%

4.90%

50 ng/ml

96.22%

3.10%

结论:

本实验使用96孔微孔板提取测试了血浆中的吲哚美辛和布洛芬含量。浓度从5 ng/ml到50 ng/ml时回收率大于85%,RSD小于5%,使用96孔板和相关的正压装置,提高了样品处理的速度和一致性,可满足相关检测的需求。

订货信息表

产品名称

规格/包装

订货号

Cleanert PEP 96微孔板

96微孔板,5 mg/1mL

PE00501-MW

Cleanert M96 生物样品前处理仪

96孔板匹配

SPE-M96

96位接收板

2mL/well,与96孔板匹配

96SP2036-2

Venusil XBP C18

2.1*150 mm, 5 μm,120 Å

VX951502-A

甲醇

HPLC, 4*4L

AH230-4

乙腈

HPLC, 4*4L

AH015-4

LC-MS级,4*2.5L/

LC365

1.5mL棕色进样样品瓶

100/pk

1109-0520

进样样品瓶瓶盖

100/pk

0915-1819

200μL内插管

100/pk

0609-0357

应用编号:YB10006


  • Cleanert PEP

    Cleanert PEP(Polar Enhanced Polymer)官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱。表面同时具有亲水性和憎水性基团,从而对各类极性,非极性化合物具有较均衡的吸附作用。

  • Cleanert M96 生物样品前处理仪

    Cleanert M96 生物样品前处理仪是专为高通量药物研发及临床药物检测而设计的一款正压型样品前处理装置,适用于96孔蛋白沉淀板、固相萃取板、SLE板、MAS板及过滤板。具有设计紧凑、操作简单、使用方便的特点。

  • Venusil XBP C18

    Venusil XBP C18 采用特殊的键合工艺,双封尾,键合密度大,碳含量高,疏水性较高( 极性低),适用于各类非极性化合物分析,在酸或碱性流动相下都有很好的分离效果

  • Burdick&Jackson溶剂

    Burdick&Jackson 是美国Honeywell( 霍尼韦尔) 跨国公司下属专门生产溶剂系列的生产商,为全美溶剂市场占有率最大的公司。B&J 提供46 种不同品种和规格的溶剂,可满足气相、液相、分光光度、农药残留分析,有机合成等方面的应用。作为高纯溶剂生产商,B&J 以ISO9001 作为质量保证体系,并且可满足GMP 用户的要求。

  • ND9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:Agilent Thermo Scientific Varian Waters etc.

资料名称 资料形式 时间
样本 2016年03月16日
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