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使用Cleanert SLE萃取血浆中替米沙坦及LC-MS/MS检测的研究

应用简介

替米沙坦是一种新型的降血压药物,是一种新型的口服非肽类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,该产品已广泛应用于临床治疗。本应用采用固液萃取法,建立了血浆中替米沙坦的萃取净化方法,可准确测定出血浆中替米沙坦的浓度,为临床用药提供依据。

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替米沙坦是一种新型的降血压药物,是一种新型的口服非肽类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,该产品已广泛应用于临床治疗。本应用采用固液萃取法,建立了血浆中替米沙坦的萃取净化方法,可准确测定出血浆中替米沙坦的浓度,为临床用药提供依据。

目标物信息

图1 替米沙坦结构图

材料及仪器

Cleanert SLE 96深孔板(600 mg/3mL);96孔氮吹仪;96孔板正压装置;96孔收集板;Venusil XBP C18(A)(2.1*150 mm,5 μm,120 Å);API 4000+。

样品处理方法

样品预处理

取300 μL血浆样品与300 μL 2%甲酸水溶液进行混合稀释,涡旋1 min,混合均匀。

净化过程

上样:将600 μL混合的预处理液加入96孔板,静止5-10 min;

洗脱:3次加入2 mL共6mL甲基叔丁基醚进行目标物洗脱,依靠重力进行洗脱操作,每次洗脱后等待2-5 min使得萃取更充分。

浓缩:将洗脱液在35℃下氮吹干,使用300 μL乙腈/水(60/40,v/v)进行重定容,进样检测。

仪器检测条件

HPLC条件

色谱柱:Venusil XBP C18(A)(2.1*150 mm, 5 μm, 120 Å)

流速:200 μL/min

柱温:30 ℃

进样量:3 μL

流动相:乙腈/水(65/35,v/v)

质谱条件

扫描模式:电喷雾电离正模式

采集模式:多反应监测(MRM)

表1 参数信息

化合物

Q1

Q3

DP

CE

替米沙坦

516.2

306.3

126

50

276.2*

132

66

211.1

130

57

注:加*号为定量离子

结果

图2 替米沙坦标准溶液色谱图(10 ng/mL)

图3 血浆加标样色谱图(加标浓度为10 ng/mL)

图4 血浆样品色谱图


表2 加标回收率及LOD

加标浓度 (ng/mL)

平均回收率 (n=5%)

RSD (n=5%)

LOD (ng/mL)

2

87.6

4.36%

0.1

10

92.7

3.21%

1000

94.9

3.18%

结论

本实验使用Cleanert SLE 96孔板萃取了血浆中的替米沙坦。浓度范围为2 ng/mL到1000 ng/mL,回收率大于87%,RSD小于5%,可以满足临床研究检测替米沙坦的需要。

订货信息表

产品名称

规格/包装

订货号

Cleanert SLE

96深孔板,600mg/3mL

HC6003Q-7DW

96孔氮气浓缩仪

96孔板匹配

NV96-G

96位接收板

2mL/well,与96孔板匹配

96SP2036-2

Venusil XBP C18(A)

2.1*150mm,5μm,120 Å

VX951502-A

乙腈

HPLC, 4*4L

AH015-4

LC-MS级,4*2.5L/

LC365

产品名称

规格/包装

订货号

Cleanert SLE

96深孔板,600mg/3mL

HC6003Q-7DW

96孔板负压装置

96孔板匹配

VM96

Cleanert M96 生物样品前处理仪

96孔板匹配

SPE-M96

96孔氮气浓缩仪

96孔板匹配

NV96-G

96位接收板

2mL/well,与96孔板匹配

96SP2036-2

Venusil XBP C18(A)

2.1*150mm5μm,120 Å

VX951502-A

乙腈

HPLC, 4*4L

AH015-4

LC-MS级,4*2.5L/

LC365

应用编号:YB10009


  • Cleanert SLE 系列 —— 传统液液萃取的终结者!

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  • Cleanert V96 氮吹浓缩仪

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  • Cleanert M96 生物样品前处理仪

    Cleanert M96 生物样品前处理仪是专为高通量药物研发及临床药物检测而设计的一款正压型样品前处理装置,适用于96孔蛋白沉淀板、固相萃取板、SLE板、MAS板及过滤板。具有设计紧凑、操作简单、使用方便的特点。

资料名称 资料形式 时间
样本 2016年03月16日
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