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辣椒油中罗丹明B的分析方法

应用简介

本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法,建立了辣椒油中罗丹明B的检测方法。样品经20%丙酮的正己烷溶液(V/V)提取,Cleanert Alumina-N固相萃取柱净化,Venusil MP C18色谱柱(4.6 × 150 mm,5 µm,100 Å)分离,水和甲醇为流动相进行洗脱,外标法进行定量。结果表明,罗丹明B添加量为0.05 mg/kg时,回收率在90% ~ 100%之间,能够满足检测要求。

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前言

罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精,俗称花粉红,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。经老鼠试验发现,罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤,被怀疑是致癌物质。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光,用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂,但后来实验证明罗丹明B会致癌,现在已不允许用作食品染色。

因此通过有效的实验技术手段,对辣椒油中的有关罗丹明B残留进行监控,以确保消费者对辣椒油消费的安全具有重要意义。

本实验通过优化前处理方法建立了罗丹明B在辣椒油中的高效液相色谱的检测方法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪(紫外检测器);

博纳艾杰尔12位负压SPE装置。

试剂材料

丙酮、甲醇、正己烷为色谱纯;实验用水为超纯水;罗丹明B标准品(纯度99%);

一次性无菌注射器;Nylon针式过滤器(0.45 µm,直径13 mm);

Cleanert Alumina-N固相萃取柱:2000 mg/6 mL

样品制备

样品提取

称取1 g辣椒油于40 mL玻璃瓶中,加入10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V),振荡摇匀后待净化。

样品净化

先将小柱用6 mL正己烷活化平衡,然后将待净化液过柱,弃去全部流出液,然后用10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V)进行淋洗,最后用10 mL 2%氨化甲醇(V/V)洗脱。收集洗脱液于40℃氮气吹干,用1 mL甲醇溶解残留物,过0.45 µm Nylon针式过滤器后待测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

液相条件

色谱柱:Venusil MP C18,5 µm,100 Å,4.6 × 150 mm

流动相:甲醇︰水=75︰25(V/V)

柱  温:30℃

进样量:20 µL

检测波长:550 nm

结果与讨论

实验结果

由表1可知,采用固相萃取结合液相色谱法检测罗丹明B,辣椒油基质加标回收率在90%以上,能够满足标准要求。

表1.辣椒油中罗丹明B加标回收实验结果

物质名称

保留时间

添加水平/mg/kg

平均回收率

/%

RSD

/%

罗丹明B

5.578

0.05

95.7

1.3

图1. 0.05 µg/mL罗丹明B标准溶液液相色谱图

图2. 辣椒油基质空白液相色谱图

图3. 0.05 mg/kg辣椒油基质加标液相色谱图

结论

本实验建立了辣椒油中罗丹明B残留量的检测方法,并结合高效液相色谱对辣椒油中罗丹明B的含量进行了测定。对于加标量为0.05 mg/kg的辣椒油样品,回收率在90% ~ 100%之间,符合实验要求。

附:相关产品

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

Venusil MP C18

5   µm,100 Å,4.6 × 150 mm

1支

VA951505-0

Cleanert Alumina-N

2000 mg/6 mL

30支/包

AL20006N

Qdaura® 卓睿全自动固相萃取系统

4通道

1台

SPE-40

15位氮吹仪

15位

1台

NV15-M

保护柱套

适用于4.6 × 10 mm和2.1 × 10 mm

1支

SH-100

直联式保护柱芯

5 µm,100 Å;4.6 × 10   mm

4支/包

VA950105-0S

1.5 mL样品瓶

短螺纹透明带书写处

32   × 11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5 mL样品瓶盖

9   mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色PTFE隔垫

45°Shore A; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

Nylon针式过滤器

单膜,13 mm,0.45 µm

200个/包

AS021345

一次性注射器

2 mL无针头

100支/包

LZSQ-2ML

应用编号:AF10029

 


  • Venusil MP C18

    Venusil MP C18 是一款通用型制备柱,适用于分离 极性和非极性化合物。

  • Cleanert Alumina N

    Cleanert Alumina N 中性氧化铝萃取柱pH=7.5;强极性吸附剂。表面呈中性,容易保留杂环类(含氮,磷,硫基),芳香烃和有机胺等富电子化合物。经过特殊去活处理,以保证样品的前处理。

  • Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪

    Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪是针对食品、农产品、医药等行业污染物分析而设计的样品前处理设备,可以实现从活化、上样、淋洗至洗脱整个固相萃取过程的全自动化。4 萃取通道,连续处理24 个样品,通过独特的设计,实现小体积上样的同时,兼顾大体积样品中有机物、重金属、农药残留等痕量污染物的富集。

  • ND9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:Agilent Thermo Scientific Varian Waters etc.

  • 尼龙(Nylon通用)

    广泛的化学相容性(避强酸),良好的柔韧性 ,与大多数试剂相容,低蛋白吸附。 应用于电子、微电子、半导体工业水过滤;药液、饮料、高纯化学品的过滤

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